Иммуномодулирующие свойства препарата Циннабсин
Уже на протяжении многих лет комплексный натуральный препарат «Циннабсин» с успехом применяется при лечении риносинусита, аденоидита, назофарингита [3, 7, 8]. Клинические эффекты препарата связывают с восстановлением носового дыхания, разжижением густого носового секрета, активацией механизмов естественного очищения полости носа и околоносовых пазух и, предположительно, с позитивным влиянием на реакции иммунитета, особенно местного характера. Известно, что препарат «Циннабсин» состоит из компонентов минерального (Cinnabaris, Kalium bichromicum) и растительного (Hydrastis, Echinacea) происхождения, и предполагается, что в основе его действия лежит влияние на стадии воспалительного процесса. Однако значение иммунных механизмов в действии препарата практически не исследовано.
В настоящем сообщении представлены новые данные о влиянии комплексного препарата «Циннабсин» на продукцию клетками миндалин детей клеточных и гуморальных факторов иммунитета и воспаления, выполненные методами молекулярной иммунологии.
Материал и методы
В условиях in vitro исследовано действие препарата «Циннабсин» в разведениях 10-100 мкг/пробу на спонтанную продукцию провоспалительных (интерлейкин1β, Ил-1) и противовоспалительных (Ил-10) цитокинов. Исследовалось также содержание регуляторного и антивирусного фактора – γ-интерферона (γ-ИФ), его антагониста – интерлейкина-4 (Ил-4). Применялись наборы реактивов производства ООО «Цитокин» (Россия) и иммуноферментный анализатор Stat FAX-2100 (США). Кроме того, в культуре клеток после инкубации с препаратом определялись изменения в составе клеток при действии препарата на экспрессию поверхностных лейкоцитарных антигенов по кластерам дифференциации клеток (CD): CD16+ , CD14+ , фенотипически отражающих представительство клеточных факторов врожденного иммунитета [2]. Применялся розеточный метод [6] с использованием консервированных эритроцитов, «нагруженных» соответствующими моноклональными антителами, и оптический микроскоп Olympus-С321 (Япония).
Объектом исследований были клетки гипертрофированных глоточных миндалин детей в возрасте от 3 до 7 лет, удаленных по медицинским показаниям. Условия получения клеточной массы, использование различных сред для культивирования, время культивирования разработаны и описаны ранее [4]. Дополнительно исследовали влияние препарата «Циннабсин» на естественную цитолитическую активность клеток глоточной миндалины детей в отношении ксеногенных ядросодержащих эритроцитов, как это рекомендовано О.Ф. Мельниковым и Т.А. Заяц [5]. Всего in vitro было поставлено 90 проб. Статистическая обработка проведена с применением параметрического критерия «t» Стьюдента, а при обработке процентных соотношений – метода углового преобразования Фишера [1].
Результаты исследований и их анализ
Было установлено, что препарат «Циннабсин», как в дозировке 10 мкг/мл, так и 100 мкг/мл увеличивал в культуре клеток число клеток с экспрессией антигена CD16+ (табл. 1), тогда как достоверное увеличение числа клеток с экспрессией антигена CD14+ выявлялось только при концентрации препарата в более низкой дозе – 10 мкг/мл. Увеличение содержания клеток CD16+ сочеталось с повышением деструктивной активности клеток миндалин под влиянием препарата (рис. 1). Вектор изменений при действии препарата «Циннабсин» на клетки глоточной миндалины в культуре in vitro был направлен в сторону снижения провоспалительного интерлейкина-1β и повышения противовоспалительного интерлейкина-10, и наиболее достоверные данные получены при концентрации препарата 100 мкг/мл (рис. 2).
Рис. 1. Влияние препарата «Циннабсин» на функциональную активность естественных цитолитических клеток.
Рис. 2. Влияние препарата «Циннабсин» на продукцию цитокинов Ил-1β и Ил-10 клетками глоточной миндалины в культуре in vitro
Рис. 3. Влияние препарата «Циннабсин» на продукцию гамма-интерферона и интерлейкина-4 клетками глоточной миндалины детей в культуре in vitro.
Препарат «Циннабсин» достоверно (р<0,01стимулировал продукцию γ-ИФ и не изменял концентрации интерлейкина-4 (рис. 3). Отсутствие эффекта стимуляции продукции Ил-4 свидетельствует о том, что препарат не активировал Th2-хелперы и, таким образом, не влиял на формирование проаллергических типов иммунных реакций в клетках миндалин.
Если сопоставить вектор и количество отклонений (±30% от среднего значения каждого показателя) в поставленных 90 пробах культур клеток (табл. 2.), то можно считать доказанным, что комплексный натуральный препарат «Циннабсин» является активным иммуномодулирующим средством и, по крайней мере, весомая часть его клинической эффективности обусловлена иммунологическими и противовоспалительными механизмами. Таким образом, авторами в культуре клеток глоточных миндалин детей исследовано влияние комплексного натурального препарата Циннабсин на продукцию клетками различных групп цитокинов (γинтерферон, интерлейкины 1, 4, 10), экспрессию поверхностных антигенов лейкоцитов – CD14+ , CD16+ , а также цитолитическую активность естественных киллеров. По сумме влияний и векторам иммуномодуляции можно констатировать модулирующее влияние препарата на активность различных реакций иммунитета, что позволяет сделать вывод о выраженном противовоспалительном и противовирусном действии препарата Циннабсин.
О.Ф. МЕЛЬНИКОВ